Американские и южноафриканские ученые разработали чувствительный метод экспресс — диагностики туберкулеза, подходящий для применения в развивающихся странах.
Об этом сообщает N+1 со ссылкой на Science.
Результаты работы представлены на 252-м Национальном слете-выставке Американского химического общества в Филадельфии.
По оценкам Всемирной организации здравоохранения, в мире туберкулезом болеет около 10 миллионов человек, почти два миллиона из них ежегодно умирают от этой инфекции.
Основной фактор профилактики распространения туберкулеза и успешного лечения заразившихся — скрининг и выявление болезни на ранних стадиях. В развитых странах с этой целью используют сочетание рентгенографии легких и выявление ДНК туберкулезной микобактерии в мокроте.
Такой подход надежен, но дорогостоящ, поэтому в развивающихся странах диагностика проводится по одной из двух «классических» методик. Одна из них — микроскопия мазков мокроты с окраской по Цилю-Нельсену, что требует значительной концентрации микроорганизмов, тщательной и длительной подготовки образцов, а также часто дает ложноположительные результаты. Вторая — проба Манту — занимает три дня и не отличается высокой точностью.
Физиологи в течение более чем 10 лет изучали, как различные микроорганизмы присоединяют сахара к макромолекулам своей клеточной стенки. Они выяснили, что микобактерия туберкулеза, в отличие от большинства других микроорганизмов, использует для этих целей дисахарид трегалозу, который соединяется с миколовой кислотой.
Ученые химически соединили трегалозу с сальватохромным флуоресцентным красителем DMN. Он светится в ультрафиолете только при отсутствии воды. Поскольку клеточная стенка состоит из жирорастворимых веществ, отталкивающих воду, встраивание в нее комплекса трегалозы с DMN вызывает зеленое свечение красителя, видимое под флуоресцентным микроскопом. В ходе экспериментов с образцами мокроты ученые выяснили, что после обработки трегалозой с DMN флуоресценция живых микобактерий появляется уже через пять минут и достигает максимума через час. При этом, анализ по чувствительности приближается к ДНК-диагностике. Другие бактерии, такие как кишечная палочка или стафилококк, трегалозу не присоединяют и не окрашиваются. Мертвые микобактерии также не поглощают сахар с красителем и не флуоресцируют.
По мнению исследователей, флуоресцентная микроскопия мазков мокроты с окраской DMN-трегалозой может стать доступным и надежным методом ранней диагностики туберкулеза в развивающихся странах.